Dulbecco PBS ir PBS skirtumas

DPBS vs PBS

PBS, arba fosfatinis buferinis tirpalas, ir Dulbecco fosfato buferinis tirpalas (DPBS), yra buferiniai druskos tirpalai, naudojami biologiniuose tyrimuose. PBS ir DPBS naudojami tyrimuose, kuriuose dalyvauja ląstelės. Tirpalo jonų koncentracija ir osmoliariškumas yra izotoniniai, tai yra, suderinami su žmogaus kūnu. Buferis padeda užtikrinti ir išlaikyti stabilų 7,2–7,6 pH.

Tarp PBS ir DPBS reikšmingo skirtumo nėra. Abiejuose jų yra natrio fosfato, natrio chlorido ir, jei reikia, kalio fosfato ir kalio chlorido. Kiti preparatai, tokie kaip DPBS, gali turėti kalcio ir magnio arba jo neturi. PBS ir DPBS turi daugybę programų, nes jos nėra kenksmingos ląstelėms. Tiek PBS, tiek DPBS gali būti naudojami skalauti instrumentus ar indus, užterštus ląstelėmis. Taip pat abu jie gali būti naudojami skiedžiant medžiagas. Skiedikliuose, tokiuose kaip baltymai, esančios vandens molekulės sustabdomos ir išdžiovinamos. Vanduo, kuris dera su medžiaga, apsaugo medžiagą nuo konformacijos pokyčių, tokių kaip denatūracija. Kalcio ir magnio tirpalai gali apriboti tripsino veiklą. Elipsometrijoje baltymo adsorbcija gali būti išmatuota imant bazinį spektrą naudojant PBS.

Fosfato buferinis tirpalas su priedais, tokiais kaip EDTA, gali būti naudojamas surištoms ląstelėms atskirti. Krituliai susidaro, kai cinko, dvivalenčio metalo, pridedama prie PBS, todėl jo negalima dėti į atjungtas ląsteles. Tokio tipo situacijose vietoj cinko naudojamas prekės buferis.

Fosfato buferinis tirpalas ir „Dulbecco“ fosfato buferinis tirpalas yra paruošiami įvairiais būdais. Vienas iš būdų jį paruošti yra ištirpinti 800 g. natrio chloridas, 20 g. kalio chloridas, 2 molekulės vandens, 24 g. kalio fosfato, o 144 g. natrio fosfato 8 l distiliuoto vandens. Rezultatas bus 10 litrų 10x PBS. Ruošdami buferinius tirpalus, tiesiogiai išmatuokite PBS pH naudodami pH metrą. Tirpalo pH gali būti reguliuojamas natrio hidroksidu arba druskos rūgštimi. Gaunamas skiediklio fosfatu buferinis tirpalas, kurio galutinė koncentracija yra 10 mM fosfato, 137 mM natrio chlorido, 2,7 mM kalio chlorido ir pH 7,4. Fritschas, Sambrookas ir Maniatisas savo knygoje pavadinimu „Molekulinis klonavimas“ paruošia buferinius tirpalus. Atitinkamai litrui 1x PBS ruošiama 800 ml tirpalo. distiliuoto vandens. Įtraukite 8 g. natrio chlorido, taip pat 0,2 g. kalio chlorido. 1,44 g. po to pridedama 0,24 g natrio fosfato. kalio fosfato. Įpilkite druskos rūgšties, kad pH būtų 7,4. Norėdami sugalvoti 1 litrą PBS, įpilkite daugiau distiliuoto vandens, kol ištirpsite iki 1 litro. Gautą tirpalą išpilkite į alikvotinę dalį ir naudokite autoklavą tirpalo sterilizavimui. Autoklavas sureguliuojamas iki 121 ° C ir 20 minučių autoklavas teka skysčio ciklu. Vėliau tirpalą laikykite kambario temperatūroje.

Nors fosfatu buferinis druskos tirpalas ir „Dulbecco“ fosfato buferinis tirpalas yra paruošiami įvairiais būdais, turinys vis tiek yra tas pats. Todėl, nepaisant to, kaip ji ruošiama, rezultatai ir naudojimo būdai vis dar yra tie patys.

Santrauka:

1.PBS, arba fosfatiniu buferiniu tirpalu, ir Dulbecco fosfato buferiniu tirpalu (DPBS), yra buferiniai fiziologiniai tirpalai, naudojami biologiniuose tyrimuose.

2.Tirpalo jonų koncentracija ir osmoliariškumas yra izotoniniai, tai yra, suderinami su žmogaus kūnu. Buferis padeda užtikrinti ir išlaikyti stabilų 7,2–7,6 pH.

3.Nėra jokio reikšmingo skirtumo tarp PBS ir DPBS. Abiejuose jų yra natrio fosfato, natrio chlorido ir, jei reikia, kalio fosfato ir kalio chlorido. Kiti preparatai, tokie kaip DPBS, gali turėti kalcio ir magnio arba jo neturi.

4.Bet PBS ir DPBS gali būti naudojami skalauti instrumentus ar indus, užterštus ląstelėmis. Taip pat abu jie gali būti naudojami skiedžiant medžiagas. Skiedikliuose, tokiuose kaip baltymai, esančios vandens molekulės sustabdomos ir išdžiovinamos. Vanduo, kuris dera su medžiaga, apsaugo medžiagą nuo konformacijos pokyčių, tokių kaip denatūracija. Kalcio ir magnio tirpalai gali apriboti tripsino veiklą. Elipsometrijoje baltymo adsorbcija gali būti išmatuota imant bazinį spektrą naudojant PBS.

5.Fosfato buferinis tirpalas su priedais, tokiais kaip EDTA, gali būti naudojamas surištoms ląstelėms atskirti. Krituliai susidaro, kai cinko, dvivalenčio metalo, pridedama prie PBS, todėl jo negalima dėti į atjungtas ląsteles. Tokio tipo situacijose vietoj cinko naudojamas prekės buferis.

6.PBS ir DPBS paruošiami įvairiais būdais. Nors fosfatu buferinis druskos tirpalas ir „Dulbecco“ fosfato buferinis tirpalas yra paruošiami įvairiais būdais, turinys vis tiek yra tas pats. Todėl, nepaisant to, kaip ji ruošiama, rezultatai ir naudojimo būdai vis dar yra tie patys.