Skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry baltymų analizės

pagrindinis skirtumas tarp bradfordo ir žemo baltymo analizės yra tas Bradfordo baltymų tyrimas pagrįstas Coomassie brilianto mėlynojo G-250 dažų absorbcijos pokyčiu, o Lowry baltymų tyrimas pagrįstas vario jonų (Cu +) jonų, susidarančių oksidacijos būdu peptidinių ryšių su Folin-Ciocalteu reagentu, reakcija..

Tyrimas yra analizės metodas, padedantis apibūdinti pagrindinius mėginio funkcinius komponentus. Taigi tyrimas gali būti tiek kokybinis, tiek kiekybinis. Daugelyje sričių, įskaitant laboratorinę mediciną, farmakologiją, aplinkos biologiją, molekulinę biologiją, biochemiją ir imunologiją, tokie tyrimai naudojami įprastu būdu. Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimas yra du biocheminiai tyrimai, kurie nustato baltymų koncentraciją mėginio tirpale. Abiejuose tyrimuose rezultatams gauti naudojami kolorimetriniai metodai.

TURINYS

1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra Bradfordo baltymų analizė
3. Kas yra Lowry baltymų analizė
4. Bradfordo ir Lowry baltymų analizės panašumai
5. Šalutinis palyginimas - Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimas lentelės pavidalu
6. Santrauka

Kas yra Bradfordo baltymų analizė?

Bradfordo baltymų tyrimas yra greita spektroskopinė analitinė baltymų analizės procedūra. Tai parodo aukštą tikslumą matuojant baltymų koncentraciją tirpale. Marionas Bradfordas šią procedūrą pristatė 1976 m. Šiame tyrime bendra reakcija pagrįsta išmatuotų baltymų aminorūgščių sudėtimi. Kitaip tariant, Bradfordo baltymų tyrimas yra kolorimetrinis tyrimas. Tam naudojami ryškiai mėlyni dažai „Coomassie“. Taigi šis kolorimetrinis baltymų tyrimas priklauso nuo dažų absorbcijos poslinkio. „Coomassie“ ryškiai mėlynas G-250 yra trijų formatų: katijoninis (raudonas), anijoninis (mėlynas) ir neutralus (žalias). Rūgštingomis sąlygomis raudona dažų forma virsta mėlyna. Tai patvirtina baltymo surišimą. Jei baltymų nėra, tirpalas gali likti rudos spalvos.

01 paveikslas: Bradfordo baltymo tyrimas

Bradfordo baltymų tyrimas skiriasi nuo kitų baltymų tyrimų, nes jis yra mažiau jautrus įvairių cheminių junginių, esančių baltymų tirpale, trukdžiams. Šie junginiai apima natrį, kalį, gliukozę, sacharozę ir kt.

Kas yra Lowry baltymų analizė?

Lowry baltymų tyrimas yra biocheminis tyrimas, naudojamas bendram baltymo kiekiui tirpale nustatyti. Oliveris H. Lowry yra asmuo, sukūręs šį reagentą 1940 m. Procedūra vaizduoja bendrą baltymo koncentraciją tirpale keičiant spalvą, proporcingą baltymo koncentracijai tirpale. Taigi tai taip pat yra kolorimetrinis baltymų tyrimas.

Šios procedūros pagrindas yra vario jonų (Cu +), susidarančių oksidavus peptidinius ryšius, ir Folin-Ciocalteu reagento reakcija. Taip pat šiame reagente yra fosfomolibdo rūgšties ir fosforo-volframo rūgšties. Tačiau Lowry baltymo tyrimo reakcijos mechanizmas nėra gerai suprantamas. Tačiau tai apima cisteino, triptofano ir tirozino liekanų oksidaciją redukuojant Folino-Ciocalteu reagentą.

02 paveikslas: Lowry baltymų tyrimas

Cisteino liekanos prisideda prie absorbcijos, stebimos Lowry baltymų tyrime, ir reakcijos rezultatas yra ryškiai mėlyna molekulė; heteropolija molibdeno mėlyna. Šios molekulės sumažėjimas matuojamas absorbcija esant 660 nm. Taigi cisteino ir triptofano likučių, sumažinusių Folin-Ciocalteu reagentą, koncentracija lemia bendrą baltymo koncentraciją tirpale..

Kokie yra Bradfordo ir Lowry baltymų analizės panašumai?

• Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimai nustato baltymų koncentraciją tirpale.
• Abu metodai yra kolorimetriniai.
• Taip pat didelis yra abiejų metodų jautrumas.

Kuo skiriasi Bradfordo ir Lowry baltymų testai?

Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimas yra dviejų rūšių tyrimai, nustatantys baltymų koncentraciją tirpale. Bradfordo baltymų tyrimas priklauso nuo Coomassie brilianto mėlynojo G-250 dažų absorbcijos poslinkio, o Lowry baltymų tyrimas priklauso nuo vario jonų, susidariusių oksidavus peptidinius ryšius, reakcijos su Folin-Ciocalteu reagentu. Taigi, tai yra pagrindinis skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimo. Bradfordo baltymų tyrimas rezultatui gauti užtrunka 15 minučių, o Lowery baltymo tyrimas užtrunka 40–60 minučių. Taigi, tai yra dar vienas skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimo. Be to, Bradfordo baltymų tyrimas priklauso nuo aminorūgščių sudėties, o Lowry baltymų tyrimas iš dalies priklauso nuo aminorūgščių sudėties. Taigi, tai taip pat skiriasi nuo Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimo.

Žemiau infrafinė informacija pateikia daugiau informacijos apie Bradfordo ir Lowry baltymų analizės skirtumus.

Santrauka - Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimas

Tyrimas yra analizės metodas, naudojamas apibūdinti pagrindinį mėginio funkcinį komponentą. Bradfordo ir Lowry baltymų tyrimai yra dviejų tipų baltymų tyrimai, kurie veikia pagal kolorimetrinius metodus. Tiek Bradfordo, tiek Lowry baltymų tyrimai nustato baltymų koncentraciją tirpale. Tačiau pagrindinis skirtumas tarp Bradfordo ir Lowry baltymų testo yra jų naudojamas kolorimetrinis metodas. Bradfordo baltymų tyrimui naudojamas Coomassie briliantinis mėlynasis G-250, o Lowry baltymų tyrimui naudojami vario jonai (Cu +) jonai ir Folino-Ciocalteu reagentas. Be to, Bradfordo metodas suteikia greitų rezultatų nei Lowry baltymų tyrimas. Tačiau abu metodai yra labai jautrūs ir jiems gali trukdyti įvairios medžiagos.

Nuoroda:

1. „Kanados botanikos žurnalas“. Kanados botanikos žurnalas - 60 (7): 1046 - PDF, prieinamas čia.
2. „Baltymų analizės chemija“. „Thermo Fisher Scientific“ - JAV, galima rasti čia.

Vaizdo mandagumas:

1. „Bradfordo baltymo tyrimas“, kurį pateikė Helito - savo darbas (CC BY-SA 4.0) per „Commons Wikimedia“