Skirtumas tarp tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos

pagrindinis skirtumas tarp tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos yra tai, kad tiesioginė imunofluorescencija naudoja vieną antikūną, kuris veikia prieš dominantį objektą, tuo tarpu netiesioginė imunofluorescencija naudoja du antikūnus norimam taikiniui žymėti.

Imunofluorescencija arba ląstelių atvaizdavimas yra technika, kuri naudojama specifiniam antigeno žymėjimui fluoroforu. Čia fluoroforas yra fluorescencinis cheminis junginys, galintis pakartotinai spinduliuoti šviesą sužadinant šviesą. Kai fluoroforas jungiasi su tiksliniu antigenu, tai leidžia aptikti tikslinę molekulę mėginyje. Toliau apibūdinant, kai antigenas jungiasi su konkrečiu antikūnu, jis gali būti konjuguotas su fluoroforais. Taigi stebint fluorescenciniu mikroskopu, mėginyje lengva nustatyti tikslinį antigeną..

Be to, yra dviejų rūšių imunofluorescencija; tiesioginė ir netiesioginė imunofluorescencija. Skirtumas tarp tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos daugiausia sietinas su naudojamų antikūnų skaičiumi ir fluoro-konjugacija. Tai yra, tiesiogiai veikiant imunofluorescencija, fluoroforas tiesiogiai konjuguojasi su pirminiu antikūnu, o netiesiogine imunofluorescencija - fluoroforas konjuguojamas su antriniu antikūnu.

TURINYS

1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra tiesioginė imunofluorescencija
3. Kas yra netiesioginė imunofluorescencija
4. Tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos panašumai
5. Lyginimas iš šono - lentelės formos tiesioginė ir netiesioginė imunofluorescencija
6. Santrauka

Kas yra tiesioginė imunofluorescencija?

Imunofluorescencija naudoja antikūnus specifiniams taikinių antigenams aptikti. Tiesioginė imunofluorescencija yra viena iš dviejų imunofluorescencijos rūšių. Tiesioginės imunofluorescencijos metu vienas antikūnas (pirminis antikūnas) apima ir fluoroforas tiesiogiai konjuguojasi su pirminiu antikūnu. Pririšus antikūną su tiksliniu antigenu, fluoroforas skleidžia fluorescenciją, kurią galima aptikti fluorescenciniu mikroskopu.

01 paveikslas: Tiesioginė imunofluorescencija

Tačiau tiesioginė imunofluorescencija yra brangus metodas, nes pirminiai konjuguoti antikūnai yra brangūs, palyginti su antriniais antikūnais. Nepaisant to, tai nereikalauja papildomo žingsnio, taigi trumpesnio metodo. Be to, nespecifiniai surišimai sumažėja tiesioginės imunofluorescencijos metu. Taigi rūšių kryžminis reaktyvumas yra mažas. Bet nustatant, tiesioginės imunofluorescencijos jautrumas yra silpnas, palyginti su netiesiogine imunofluorescencija .

Kas yra netiesioginė imunofluorescencija?

Netiesioginė imunofluorescencija yra antroji imunofluorescencijos rūšis, apimanti dviejų tipų antikūnus, tokius kaip pirminiai ir antriniai antikūnai, žymint tikslinį antigeną. Šiuo metodu fluoroforas konjuguoja su antriniu antikūnu. Taigi ši technika apima papildomą žingsnį.

02 paveikslas: Imunofluorescencija

Tačiau šio metodo jautrumas yra didelis, nes kelis fluoroforus galima konjuguoti su antriniais antikūnais ir tai palengvina aptikimą. Be to, netiesioginė imunofluorescencija yra pigesnė dėl to, kad antrinių antikūnų konjugacija yra pigesnė ir lengvesnė. Palyginti su tiesiogine imunofluorescencija, rūšių netiesioginis reaktyvumas yra didelis netiesioginiu metodu.

Kokie yra tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos panašumai?

• Jie yra dviejų tipų imunofluorescenciniai metodai.
• Abu metodai apima pirminius antikūnus ir fluoroforą.
• Be to, antigeno ir antikūno reakcija vyksta abiem būdais.
• Be to, tiek tiesioginė, tiek netiesioginė imunofluorescencija antigenui aptikti naudoja fluorescencinį mikroskopą.

Kuo skiriasi tiesioginė ir netiesioginė imunofluorescencija?

Imunofluorescencija gali būti tiesiogiai ar netiesiogiai pagrįsta fluoroforo konjugacija su naudojamais antikūnais. Tiesioginės imunofluorescencijos metu fluoroforas konjuguoja su pirminiu antikūnu, kuris yra vienas antikūnas, kuris naudojamas šioje technikoje. Priešingai, netiesioginės imunofluorescencijos metu fluoroforas konjuguoja su antriniu antikūnu, kuris yra vienas iš dviejų antikūnų tipų, naudojamų technikoje. Taigi pagrindinis skirtumas tarp tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos yra antikūnų tipas, konjuguojantis su fluoroforu.

Toliau pateiktoje infografijoje pateiktas tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos skirtumų palyginimas.

Santrauka - Tiesioginė ir netiesioginė imunofluorescencija

Imunofluorescencija yra metodas, naudojamas aptikti specifinių antigenų mėginyje. Ši technika naudoja specifinius antikūnus. Todėl antikūnai konjuguojami su fluoroforais, kad juos būtų galima aptikti naudojant fluorescencinį mikroskopą. Be to, yra du imunofluorescencijos tipai, būtent, tiesioginė ir netiesioginė imunofluorescencija. Tiesioginė imunofluorescencija apima vieną antikūną ir fluoroforą, tiesiogiai konjuguotą su šiuo antikūnu. Netiesioginė imunofluorescencija apima du antikūnus; pirminis ir antrinis bei fluoroforas, konjuguotas su antriniu antikūnu. Kadangi keli antriniai antikūnai gali jungtis su pirminiu antikūnu, o keli fluoroforai gali konjuguoti su antriniais antikūnais, netiesioginė imunofluorescencija yra jautresnis metodas nei tiesioginis. Be to, netiesioginis metodas yra pigesnis nei tiesioginis. Taigi, tai yra skirtumas tarp tiesioginės ir netiesioginės imunofluorescencijos.

Nuoroda:

1. „Imunofluorescencija“. Vikipedija, „Wikimedia Foundation“, 2018 m. Rugpjūčio 19 d. Galima rasti čia 

Vaizdo mandagumas:

1. „HSP IF IgA“ pateikė Emmanuelmas en.wikipedia, (CC BY 3.0) per „Commons Wikimedia“
2. „Imunofluorescencija“, autorius Westhayl618 - Nuosavas darbas (CC BY-SA 4.0) per „Commons Wikimedia“