Skirtumas tarp hibridizacijos in situ ir imunohistochemijos

Pagrindinis skirtumas - hibridizacija situacijose prieš imunohistochemiją
 

Vėžys ir infekcinių ligų diagnostika yra populiari tendencija, kai nauji proteomika ir genomika pagrįsti metodai yra naudojami siekiant nustatyti navikus ar infekcines ląsteles, jų proliferaciją ir ląstelių vystymosi vietas bei analizuoti daugumos užkrečiamųjų ir neužkrečiamųjų ligų genetinius pagrindus. Tai padės tiksliai apdoroti ir formuoti vaistus bei kurti pritaikytą ligų gydymo metodą. In situ hibridizacija (ISH) ir imunohistochemija (IHC) yra du tokie plačiai naudojami metodai vėžio biologijoje, o pagrindinis skirtumas tarp in situ hibridizacijos ir imunochemijos slypi molekulėse, naudojamose analizės procese.. ISH atveju nukleino rūgšties zondai naudojami analizėje, tuo tarpu IHC diagnozei nustatyti naudojami monokloniniai ir polikloniniai antikūnai..

TURINYS

1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra in situ hibridizacija
3. Kas yra imunohistochemija
4. Hibridizacijos in situ ir imunohistochemijos panašumai
5. Šalutinis palyginimas - lentelės formos hibridizacija esant situacijai ir imunohistochemijai
6. Santrauka

Kas yra hibridizacija in situ (ISH)?

Hibridizacija in situ yra nukleorūgščių hibridizacijos technika, kuri tiesiogiai atliekama ant audinio dalies ar dalies, visame audinyje arba ląstelėse. Metodas priklauso nuo Watsono Cricko papildomos bazės porų teorijos, todėl gaunami DNR-DNR hibridai arba DNR-RNR hibridai, kurie gali aptikti mutavusius genus arba nustatyti reikiamą dominantį geną. Hibridizacijos metodu kaip zondai naudojami vienos grandinės DNR sekos, dvigubos grandinės DNR sekos, vienos grandinės RNR sekos arba sintetinės oligonukleotidų sekos, o šie zondai yra pažymėti radioaktyviu fosforu jo 5 'gale atpažinimo procedūroms atlikti autoradiografijos metu arba ženklinami fluorescenciniais dažais. . Yra skirtingi ISH metodų tipai, atsižvelgiant į naudojamo zondo tipą ir taikomą vizualizacijos metodą.

01 paveikslas: Hibridizacija esant fluorescencinei situacijai

Yra daug ISH taikymo būdų, daugiausia atliekant molekulinę infekcinių ligų diagnostiką, siekiant nustatyti patogenus ir patvirtinti patogeną atliekant molekulinę diagnostiką. Jis taip pat naudojamas vystymosi biologijos, kariotipų nustatymo ir filogenetinės analizės bei chromosomų fizinio žemėlapio srityse..

Kas yra imunohistochemija (IHC)?

IHC technikoje pagrindinė analizuojama molekulė yra antigenas. IHC metu monokloniniai ir polikloniniai antikūnai yra naudojami nustatant antigenus esant infekcijai ar piktybinių ląstelių dauginimosi būklei. Metodas pagrįstas antigeno ir antikūnų surišimu, ir šiam metodui naudojami fermentų etiketės; vienas iš tokių pritaikymų yra ELISA (imunofermento tyrimas, susijęs su fermentais). Žymekliai taip pat gali būti fluorescenciniai antikūnai arba radijo bangomis pažymėti antikūnai.

02 pav. Imunohistochemija

IHC yra plačiai naudojamas vėžinių ląstelių aptikimui. Diagnostikos procedūros yra nukreiptos į navikus ląstelėse esančius antigenus, kad būtų galima identifikuoti ir apibūdinti naviką. Ta pati procedūra taikoma diagnozuojant infekcijos sukėlėjus. Monokloniniai ir polikloniniai antikūnai taip pat naudojami analizuoti skirtingus genų produktus, įgalinant antikūnų ir antigeno jungimosi reakciją tarp norimo baltymo ir įvesto sintetinio antikūno..

Kokie yra hibridizacijos in situ ir imunohistochemijos panašumai?

  • ISH ir IHC yra labai specifinės reakcijos.
  • Abi metodikos yra labai tikslios.
  • Abu būdai gali būti naudojami diagnozuojant vėžį ir infekcines ligas.
  • Šie metodai yra atliekami sterilioje in vitro aplinkoje.
  • Abu yra greiti metodai, užtikrinantys atkuriamus rezultatus.
  • ISH ir IHC naudoja aptikimo metodus, tokius kaip radijo ženklinimas ir fluorescenciniai metodai.

Kuo skiriasi hibridizacija in situ ir imunohistochemija?

In Hibridizacija situacijoje prieš imunohistochemiją

ISH yra nukleorūgščių hibridizacijos metodas, tiesiogiai atliekamas audinio daliai ar daliai arba visam audiniui. IHC yra metodas, kai monokloniniai ir polikloniniai antikūnai yra naudojami nustatant antigenus, kurie yra specialūs baltymų žymenys ant ląstelių paviršių.
Analizuotų biologinių molekulių tipas
ISH analizuoja nukleino rūgštis. IHC analizuoja baltymus-antigenus.
Biocheminės reakcijos pagrindas
Taikant šį metodą, vyksta DNR-DNR arba DNR-RNR komplementacija. Antigenų ir antikūnų sąveika dalyvauja imunohistochemijoje.
Su fermentais susiję aptikimo metodai
ISH negalima naudoti su fermentais susijusių aptikimo metodų. IHC gali būti naudojami su fermentais susiję aptikimo metodai.

Santrauka - hibridizacija in situ ir imunohistochemija

Molekulinė diagnostika yra greiti ir patvirtinantys metodai, kurie gali būti naudojami nustatyti neužkrečiamąją ligą, pavyzdžiui, vėžį ar užkrečiamąją ligą, tokią kaip ŽIV ar tuberkuliozę, remiantis ląstelėse esančiais molekuliniais žymenimis, kurie lemia ligos pasireiškimą. Molekuliniai žymekliai gali būti išreikštų baltymų pavidalu arba genetiniame lygmenyje, pagal kuriuos diegiami skirtingi nauji metodai, kurie padidina efektyvumą ir yra mažiau darbingi, nors šie metodai yra brangūs. Taigi ISH priklauso nuo DNR-DNR arba DNR-RNR hibridų susidarymo, o IHC - nuo specifinių reakcijų tarp antikūno ir antigeno. Tai yra skirtumas tarp hibridizacijos in situ.

Atsisiųskite hibridizacijos „In situ“ ir imunohistochemijos PDF versiją

Galite atsisiųsti šio straipsnio PDF versiją ir naudoti ją neprisijungus, kaip nurodyta citatos pastaboje. Atsisiųskite PDF versiją čia. Hibridizacijos ir imunohistochemijos skirtumas.

Nuorodos:

1. Duraiyan, Jeyapradha ir kt. „Imunohistochemijos pritaikymai“. „Farmacijos ir biologinių mokslų žurnalas“, „Medknow Publications & Media Pvt Ltd“, 2012 m. Rugpjūtis, galima rasti čia. Priimta 2017 m. Rugpjūčio 24 d.
2. „In situ hibridizacija (ISH)“. JAV nacionalinis biotechnologijų informacijos centras, prieinamas čia. Priimta 2017 m. Rugpjūčio 24 d.

Vaizdo mandagumas:

1. „ŽUVYS (fluorescencinė hibridizacija situacijose)“, pateikė MrMatze - Savas darbas (CC BY-SA 3.0) per „Commons Wikimedia“
2. „Immunohistochemicalstaining2“, pateikė Imoen anglų kalbos Vikipedijoje (CC BY-SA 3.0) per „Commons Wikimedia“