Skirtumas tarp nitroceliuliozės ir PVDF

Pagrindinis skirtumas - nitroceliuliozė prieš PVDF
 

Western blotting yra metodas, leidžiantis aptikti ir kiekybiškai nustatyti specifinius baltymus iš baltymų mėginio. Metodo patikimumas priklauso nuo tinkamos baltymų absorbcijos membranos parinkimo iš gelio. Yra įvairių tipų mikroporinės membranos. Nitroceliuliozės ir PVDF membranos yra dvi tokios membranos, kurias tyrėjai labiau mėgsta dėl savo ypatingų savybių, palyginti su kitų tipų membranomis. Pasirinkimas tarp nitroceliuliozės ar PVDF taip pat yra dar vienas iššūkis atliekant vakarų blotinimą. Tiek nitroceliuliozė, tiek PVDF pasižymi dideliu baltymų absorbcijos pajėgumu. Pagrindinis skirtumas tarp nitroceliuliozės ir PVDF membranos yra tas nitroceliuliozės membranos neturi galimybės nusirengti antikūnų ir pakartotinis membranos panaudojimas antikūnų reprodukcijai, tuo tarpu PVDF membranos turi striptizo ir pakartotinio panaudojimo savybes..

TURINYS
1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra nitroceliuliozė
3. Kas yra PVDF
4. Šalutinis palyginimas - nitroceliuliozė ir PVDF
5. Santrauka

Kas yra nitroceliuliozė?

Nitroceliuliozė yra polimeras, pagamintas apdorojant celiuliozę azoto rūgštimi, ir naudojamas mikroporinėms membranoms gaminti molekulinėje biologijoje, ypač atliekant blotinimo metodus, tokius kaip pietų, šiaurės ir vakarų blotinimas. Nitroceliuliozės membranų porų dydis yra nuo 3 iki 20 μm. Nitroceliuliozės mikroporinės membranos palengvina imunocheminės reakcijos, vykstančios membranos paviršiuje, nustatymą. Todėl nitroceliuliozės membranos dažnai naudojamos baltymų imobilizavimui ir specifinių baltymų aptikimui atliekant Western blot analizę. Nitroceliuliozės membranos taip pat gali imobilizuoti glikoproteinus ir nukleorūgštis.

Dėl kelių ypatybių šoninio srauto tyrimuose pirmenybė teikiama nitroceliuliozės membranoms. Nitroceliuliozės membranos sugeria baltymus didele koncentracija. Tirpiklis, naudojamas membranai drėkinti, nemažina nitroceliuliozės membranos baltymų absorbcijos. Nitroceliuliozės membranos gali būti lengvai supjaustomos norimo dydžio geliu ir pernešdamos baltymus iš gelio į membraną elektriniu ar kapiliariniu būdu. Nitroceliuliozė leidžia greičiau tekėti baltymams per membraną, turinčią didelį surišimo potencialą. Nitroceliuliozė pasižymi patobulintu valdymu. Kitas ypatingas nitroceliuliozės membranos požymis yra tai, kad ją galima lengvai klijuoti netirpstančiais vandeniui klijais ant įvairių plastikinių pagrindų..

01 paveikslas: Nitroceliuliozės membrana, skirta vakarų blotinimui

Kas yra PVDF?

Polivinilideno difluoridas (PVDF) yra fluorpolimeras, gaunamas polimerizuojant vinilideno difluoridą, ir pasižymi dideliu baltymų imobilizavimu. Todėl mikroporinės membranos, pagamintos iš PVDF, yra naudojamos Western blotinimo metoduose analizuoti specifinius baltymus iš baltymų mišinių. PVDF membranos taip pat gali būti naudojamos aminorūgščių analizei ir baltymų sekai nustatyti. Svarbiausia PVDF membranos, esančios virš nitroceliuliozės membranos, savybė yra tai, kad ją galima lengvai pašalinti antikūnus ir vėl panaudoti paskesniems antikūnų zondams..

PVDF membranos yra storesnės nei nitroceliuliozės membranos; taigi yra atsparesni pažeidimams pakartotinio naudojimo metu. PVDF membranos yra labai hidrofobinės. Todėl prieš naudojimą jie turi būti mirkomi metanolyje arba izopropanolyje.

Kuo skiriasi nitroceliuliozė ir PVDF?

Nitroceliuliozė vs PVDF
Nitroceliuliozė yra polimeras, sudarytas iš celiuliozės.	PVDF yra fluorpolimeras, gaunamas polimerizuojant vinilideno difluoridą.
Membranos poros dydis
Tipiški porų dydžiai yra 0,1, 0,2 arba 0,45 μm	Tipiški porų dydžiai yra 0,1, 0,2 arba 0,45 μm
Baltymų surišimo pajėgumas
Nitroceliuliozės baltymų jungimosi pajėgumas yra nuo 80 iki 100 μg / cm2.	PVDF baltymų jungimosi pajėgumas yra nuo 170 iki 200 μg / cm2.
Jautrumas
Tai turi mažą jautrumą, palyginti su PVDF.	Tai turi didelį jautrumą.
Mažai išreikštų baltymų aptikimas
Kadangi jautrumas nitroceliuliozės membranoms yra mažas, jis netinka mažai išreikštų baltymų aptikimui.	Tai labiau tinka mažai išreikštų baltymų aptikimui dėl didelio jautrumo.
Fono triukšmas
Tai turi mažesnį foninį triukšmą	Tai sukelia didesnį foninį triukšmą.
Sąveika su baltymais
Baltymų molekulės jungiasi prie nitroceliuliozės membranų hidrofobinės sąveikos dėka.	Baltymai jungiasi prie PVDF membranų per hidrofobinę ir dipolinę sąveiką.
Membranos pobūdis
Nitroceliuliozė yra trapi ir trapi. Tačiau yra nitroceliuliozės variantų, jie yra atsparūs.	PVDF yra patvaresnis ir pasižymi didesniu cheminiu atsparumu.
Gebėjimas nuplėšti ir pakartotinai naudoti
Nitroceliuliozė gali turėti sunkumų nusirengdama ir atkurdama neprarasdama signalo.	PVDF yra idealus programų kartojimui ir sekų darymui.
Tinkamumas
Nitroceliuliozė yra ideali mažos molekulinės masės baltymams aptikti.	PVDF yra tinkamesnis didesnės molekulinės masės baltymams aptikti.
Kiti naudojimo būdai
Nitroceliuliozė gali būti naudojama nukleorūgščių analizei ir taškinio / plyšio blotinimui.	PVDF gali būti naudojamas baltymų sekai nustatyti ir kietosios fazės tyrimo sistemoms.
Kaina
Tai yra pigiau nei PVDF membranos.	Tai yra brangesnės nei nitroceliuliozės membranos.
Išankstinio drėkinimo poreikis
Nitroceliuliozės membranos nereikia iš anksto išmirkyti metanoliu	PVDF membranoms reikia iš anksto sutepti metanoliu.

Santrauka - nitroceliuliozė prieš PVDF

Nitroceliuliozės membranos buvo pirmosios membranos, komerciškai naudojamos šoninio srauto tyrimui. Jie pasižymi dideliu baltymų įsisavinimo pajėgumu. Todėl atliekant vakarinį blotinimą naudojamos nitroceliuliozės membranos. PVDF yra dar viena membranos rūšis, naudojama atliekant Western blotting, ir ji taip pat pasižymi dideliu baltymų absorbcijos pajėgumu. Abi rūšys yra naudojamos Western blot analizėje. Tačiau PVDF membranos pasižymi ypatingesniais požymiais, todėl jos yra tinkamesnės nei vakaro blotinimas nei nitroceliuliozės membranos. Tačiau nitroceliuliozės membranos yra tinkamesnės mažo molekulinio svorio baltymams aptikti, PVDF membranos yra tinkamesnės aptikti didelės molekulinės vertės baltymus. Tai yra skirtumas tarp nitroceliuliozės ir PVDF membranų.

Vaizdo mandagumas:
1. „Western blot“ perdavimas „Bensaccount“ anglų kalbos Vikipedijoje (CC BY 3.0) per „Commons Wikimedia“

Nuoroda:
1.Luque-Garcia, Jose L., Ge Zhou, Tung-Tien Sun ir Thomas A. Neubert. „Nitroceliuliozės membranų panaudojimas baltymų apibūdinimui naudojant matricinę lazerinę desorbcijos / jonizacijos masės spektrometriją.“ Analitinė chemija. JAV nacionalinė medicinos biblioteka, 2006 m. Liepos 15 d. Internetas. 2017 m. Kovo 28 d
2. „Molekuliniai žymekliai ir augalų biotechnologijos“. „Google Books“. N.p., n.d. Žiniatinklis. 2017 m. Kovo 28 d
3. 2013 m. Balandžio 8 d., Pirmadienis. „Stebuklingi membranos dalyviai: protingai rinkitės„ Best Western “blotų rezultatus.“ Biocompare. N., 2013 m. Balandžio 8 d. Žiniatinklis. 2017 m. Kovo 28 d