Skirtumas tarp RP HPLC ir HIC

pagrindinis skirtumas tarp RP HPLC ir HIC yra tas RP HPLC naudojama labiau polinė mobilioji fazė ir mažiau polinė nejudančioji fazė. Tuo tarpu HIC naudoja nejudančią hidrofobinę fazę, leidžiančią hidrofobinėms molekulėms prie jo prisijungti.

Chromatografija yra analizės metodas, padedantis atskirti mišinį į jo komponentus. Pirmiausia mes turime ištirpinti atskirtą mėginį į tirpalą. Šis tirpalo ir medžiagos mišinys vadinamas judančiąja faze. Tada judančioji fazė praeinama per kitą medžiagą, vadinamą nejudančiąja faze. Nejudanti fazė lemia komponentų atskyrimą. Atskyrimas atsiranda dėl medžiagos pasiskirstymo tarp judančiosios ir nejudančiosios fazės.

TURINYS

1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra RP HPLC
3. Kas yra HIC?
4. Šalutinis palyginimas - RP HPLC ir HIC lentelės pavidalu
5. Santrauka

Kas yra RP HPLC?

Terminas RP HPLC reiškia Aukšto efektyvumo skysčių chromatografija atvirkštinėje fazėje. Tai apima mišinio komponentų atskyrimą pagal hidrofobiškumą. Judriojoje fazėje esantys hidrofobiniai komponentai jungiasi su stacionarioje fazėje esančiais imobilizuotais hidrofobiniais ligandais, o hidrofiliniai komponentai išplauna per nejudančią fazę, neprisirišdami prie nejudančios fazės paviršiaus..

01 paveikslas: HPLC aparatas

Be to, šis metodas yra labiau atkuriamas, palyginti su kitais chromatografijos metodais, be to, jis plačiai pritaikomas. Todėl mes naudojame šį metodą laboratorijose daugiau kaip 75% visų HPLC metodų. Dažniausiai kaip judančiąją fazę naudojame vandeninį vandens mišinį su maišomu poliniu organiniu tirpikliu. Taigi, tai užtikrins hidrofobinių komponentų pritvirtinimą tirpale prie nejudančios fazės paviršiaus.

Kas yra HIC?

Terminas HIC reiškia Hidrofobinės sąveikos chromatografija. Tai yra atvirkštinės fazės HPLC tipas, ir šis metodas daugiausia naudojamas didelėms biomolekulėms, tokioms kaip baltymai, atskirti. Taikant šį metodą, mes turime naudoti vandeninę terpę, kad padarytume biomolekulės mėginį. Taip yra todėl, kad organiniai tirpikliai gali sukelti baltymų denatūravimą. Be to, šis metodas naudoja didelių molekulių sąveiką su šiek tiek hidrofobiniu nejudančios fazės paviršiumi. Be to, mėginyje turime naudoti didelę druskos koncentraciją, nes tai skatina baltymus išlaikyti pakuotėje; šis procesas vadinamas sūdymu. Palaipsniui mažindami druskos koncentraciją, mes galime priversti biomolekules eliuotis atskirai pagal jų hidrofobiškumą.

Paprastai šis metodas naudojamas sąlygomis, priešingomis jonų mainų chromatografijai. Pirmiausia, naudodamiesi šia technika, mes turime perpilti buferinį tirpalą per kolonėlę, kad mėginyje būtų mažiau tirpios medžiagos. Tai verčia atsiskleisti baltymo hidrofobinėms sritims. Tačiau kai molekulė yra daugiau hidrofobinė, prisijungimui skatinti reikia mažiau druskos. Pirmiausia išplaunama mažiau hidrofobinių tirpių, o atsižvelgiant į druskos koncentracijos pokyčius, daugiau hidrofobinių tirpiųjų medžiagų išplaunama paskutinė.

Kuo skiriasi RP HPLC ir HIC?

Chromatografija yra analizės metodas, leidžiantis atskirti komponentus mišinyje. RP HPLC ir HIC yra du specializuoti chromatografijos metodai. Esminis skirtumas tarp RP HPLC ir HIC yra tas, kad RP HPLC naudojama labiau polinė mobilioji fazė ir mažiau polinė nejudančioji fazė, tuo tarpu HIC naudoja hidrofobinę nejudančią fazę, leidžiančią hidrofobinėms molekulėms prie jos prisitvirtinti..

Žemiau pateiktoje infografijoje apibendrinamas skirtumas tarp RP HPLC ir HIC.

Santrauka - RP HPLC vs HIC

Nuoroda:

1. „HPLC atskyrimo režimai“. Vandenys, kuriuos galite rasti čia.

Vaizdo mandagumas:

1. „Preparative HPLC“ pateikė GYassineMrabetTalk & # x2709; Šis W3C neapibrėžtas vektoriaus vaizdas buvo sukurtas naudojant „Inkscape“. - Savas darbas (CC BY 3.0) per „Commons Wikimedia“

Mokslas ir gamta