Skirtumas tarp transformacijos ir transfekcijos

Transformacija vs transfekcija
 

Transformacija ir transfekcija yra du paprasti būdai, naudojami svetimam genui įnešti į ląstelę-šeimininką. Tačiau šie būdai priklauso nuo priimančiojo ar vektoriaus sistemų tipo.

Kas yra ląstelių transformacija?

Transformacija yra technika, naudojama genams įnešti į mielių ir bakterijų ląsteles. Ši technika paprastai sukelia paveldimus genų pokyčius, taigi geno ekspresija yra nuolatinė. Bakterijų virsmą pirmą kartą pristatė 1928 m. Frederikas Griffitas. Tada aštuntojo dešimtmečio pradžioje ši technika buvo naudojama E. coli. Transformacijos proceso metu E. coli, ląstelės mirkomos šaltame CaCl tirpale₂. Šis žingsnis daro E.coli ląstelės kompetentingos. Po to kompetentingos ląstelės sumaišomos su plazmidės DNR ir inkubuojamos ant ledo 20-30 min. Tada suteikiamas trumpas šilumos smūgis, kad būtų galima pernešti DNR į ląstelę. Galiausiai ląstelės dedamos į maistinį sultinį ir inkubuojamos 37 ° C temperatūroje 60–90 min., Kad susidarytų plazmidės. Kai šie veiksmai bus sėkmingai atlikti, transformuotos ląstelės gali būti dedamos į tinkamą terpę ląstelių dauginimuisi. Kadangi transformacija laikoma neefektyvia technika, ji negali būti naudojama klonų bankams ruošti.

Kas yra ląstelių transfekcija?

Transfekcija yra svetimo geno įvedimo į žinduolių ląsteles būdas. Yra du transfekcijos būdai; būtent trumpalaikis transfekcija ir stabilus transfekcija. Laikinai pereinant, genų ekspresija vyksta ribotą laiką; taigi, pakitęs genas sukelia laikiną išraišką. Šis transfekcijos metodas yra paprastas ir greitas; taigi jis gali būti naudojamas reguliariai. Vienas trumpalaikio transfekcijos trūkumas yra sunkumas pritaikyti didelio masto baltymų sintezės sistemas.

Stabilios transfekcijos metu tikslinis genas yra integruotas į ląstelės-šeimininkės genomą, taigi, priešingai nei trumpalaikis transfekcija, geno ekspresija yra nuolatinė.

Kuo skiriasi transformacija ir transfekcija??

• Transformacija yra geno įvedimas į prokariotinę ląstelę (bakterinę ir mielių), tuo tarpu transfekcija paprastai vadinama geno įvedimu į žinduolio ląstelę..

• Transformacija lemia paveldimą genų pakitimą, tuo tarpu transfekcija gali sukelti laikiną raišką arba nuolatinius genų pokyčius..