Skirtumas tarp trumpalaikio ir stabilaus transfekcijos

Pagrindinis skirtumas - trumpalaikis ir stabilus transfekcija
 

Transfekcija yra procesas, kuris susijęs su eukariotų ląstelių genų perdavimu, naudojant cheminius ar fizinius metodus. Transfekciją galima suskirstyti į du pagrindinius tipus, vadinamus trumpalaikiu transfekcija ir stabiliu transfekcija. Laikinojo transfekcijos metu dominantis genas nesugeba integruotis su šeimininko genomu ir yra trumpai ekspresuojamas šeimininko viduje, tuo tarpu stabilios transfekcijos metu dominantis genas integruojasi su priimančiojo genomu ir ilgą laiką išsilaiko keliose kartose.s. Tai yra pagrindinis skirtumas tarp trumpalaikio ir stabilaus transfekcijos. Abiem atvejais transfekcija yra sėkminga ir išreiškiami genai.

TURINYS
1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra trumpalaikis transfekcija
3. Kas yra stabilus transfekcija
4. Šalutinis palyginimas - trumpalaikis ir stabilus transfekcija
5. Santrauka

Kas yra trumpalaikis transfekcija?

Transfekcija yra svarbi priemonė genų įterpimui į eukariotų ląsteles. Tarp dviejų transfekcijos rūšių pereinamasis transfekcija yra įprastas genų perdavimo būdas. Per vektorių svetimi genai transformuojami ląstelių-šeimininkų viduje. Kai svetima DNR patenka į šeimininko ląstelę, ji turi dvi galimybes. Jis gali arba integruotis su priimančiojo genomu ir atkartoti, arba likti viduje, neintegruojantis į genomą. Dėl trumpalaikio transfekcijos pasireiškia laikina įterptų genų ekspresija, neįsijungiant į šeimininko genomą. Genai ekspresuoja ir gamina koduotą baltymą, kol ląstelė pasiskirsto. Tačiau dėl nepajėgios integracijos ji negali atkartoti ir patekti į ateities kartas. Šis transfekcijos būdas yra sėkmingas trumpą laiką. Ląstelių dalijimosi metu ar dėl kai kurių kitų veiksnių svetima DNR yra skaidoma. Pereinamasis transfekcija parodyta, kai svetima DNR yra labai suvyniotos DNR formos.

01 paveikslas: Laikinas transfekcija

Kas yra stabilus transfekcija?

Stabili transfekcija rodo sėkmingą svetimų genų integraciją į šeimininko genomą. Kai svetima DNR patenka į ląstelės-šeimininkės vidų, dalis pašalinės DNR integruojasi į šeimininko genomą ir tampa jo dalimi. Taigi svetimosios DNR taip pat dauginasi ir pereina į ateities kartas, kai šeimininko genomas atkartoja. Šis transfekcijos būdas yra sudėtingas ir retas. Tačiau dėl stabilaus transfekcijos į genomą šis bruožas išlieka ilgiau nei kelias kartas.

Stabilus transfekcija yra sunkus procesas, reikalaujantis efektyvaus DNR pristatymo ir ląstelių pasisavinant svetimą DNR į savo genomą. Taigi linijinė DNR skatina stabilų transfekciją nei žiedinė DNR. Tačiau stabilus transfekcijos laipsnis yra maždaug vienas iš 10⁴ transformuotos ląstelės. Stabilų transfekciją galima pastebėti kartu parinkus žymeklį ir dirbtinai parinkus terpę..

02 paveikslas: Stabilus transfekcija

Kuo skiriasi trumpalaikis ir stabilus transfekcija?

Laikinas ir stabilus transfekcija
Užsienio DNR neintegruoja į šeimininko genomą.	Užsienio DNR integruojasi į šeimininko genomą ir tampa jo dalimi.
Replikacija pagrindiniame kompiuteryje
Laikinai transfekuoti genai neatkartoja šeimininko. Taigi genai nėra perduodami kitoms kartoms.	Genai pakartojami šeimininko šeimoje ir perduodami ateities kartoms.
Genų ekspresijos trukmė
Genai išreiškiami ribotam laikotarpiui ir po to sunaikinami.	Genai tampa genomo dalimi ir ilgą laiką išreiškiami kartos viduje.
Naudokite
Tai naudinga tiriant genų ar genų produktų trumpalaikės ekspresijos poveikį.	Tai naudinga tiriant genų ekspresijos poveikį ilgainiui.
Transfekcijos aptikimas
Genai yra ekspresuojami ir juos galima lengvai aptikti įdėjus reporterio geną.	Stabilų transfekciją galima lengvai aptikti įdėjus pasirenkamą žymeklį ir atliekant dirbtinę atranką laikmenoje.
Atsiradimas ir procesas
Laikina transfekcija yra įprasta ir nėra sudėtinga.	Stabilus transfekcija yra reta atvejis ir sudėtinga.
DNR pobūdis
Labai perkaitinta DNR yra tinkama laikinai transfekcijai.	Linijinė DNR tinka stabiliam transfekcijai.
Programos
Tai naudojama genų numušimo ar slopinimo su slopinančiomis RNR tyrimams, nedidelio masto baltymų gamybai	Tai naudojama baltymų gamybai atliekant ilgalaikius ilgalaikius farmakologinius tyrimus, genų terapiją, ilgalaikio genetinio reguliavimo mechanizmų tyrimus.

Santrauka - trumpalaikis ir stabilus transfekcija

Laikinas ir stabilus transfekavimas yra du transfekacijų tipai, pasireiškiantys genams perduodant į eukariotų ląsteles nevirusinėmis sistemomis. Transformuota svetima DNR nėra integruota į priimančiojo genomą atliekant trumpalaikį transfekciją, tuo tarpu stabilios transfekcijos metu ji integruojasi su šeimininko genomu. Apskritai suvyniota DNR yra trumpalaikė transfekcija, tuo tarpu linijinė DNR teikia pirmenybę stabiliam transfekcijai. Tai yra skirtumas tarp trumpalaikio ir stabilaus transfekcijos. Tačiau trumpalaikis transfekcija yra labiau paplitusi ir lengvesnė, palyginti su stabilia transfekcija. Bet vieno iš dviejų pasirinkimas priklauso nuo genų perdavimo tikslo ir tyrimo projekto trukmės.

Nuorodos:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay ir Thomas A. Kost. „Laikina ir stabili geno ekspresija žinduolių ląstelėse, perduota rekombinantiniu bakuloviruso vektoriu.“ Jungtinių Amerikos Valstijų nacionalinės mokslų akademijos leidiniai. Nacionalinė mokslų akademija, 1999 m. Sausio 5 d. Internetas. 2017 m. Kovo 25 d
2. Kim, Tae Kyung ir James H. Eberwine. „Žinduolių ląstelių transfekcija: dabartis ir ateitis“. Analitinė ir bioanalitinė chemija. „Springer-Verlag“, 2010 m. Rugpjūčio mėn. Žiniatinklis. 2017 m. Kovo 25 d