Skirtumas tarp konkuruojančios ir nekonkurencingos ELISA

pagrindinis skirtumas tarp konkuruojančios ir nekonkurencingos ELISA yra ta konkuruojančiame ELISA tyrime naudojamas slopinimo antigenas, o nekonkurenciniame ELISA tyrime nenaudojamas slopinimo antigenas.

Su fermentais susijęs imunosorbentinis tyrimas (ELISA) yra imunologinis tyrimas, kurio metu nustatomi įvairūs taikiniai, tokie kaip antikūnai, antigenai, baltymai ir glikoproteinai. Tai greitas ir paprastas metodas. Taigi, jis dažniau naudojamas tyrimų ir diagnostikos tikslais. ELISA apima fermentų naudojimą ir specifinį antikūnų ir antigeno surišimą. Remiantis tuo, kaip vyksta reakcijos, yra keturi ELISA tipai: tiesioginis ELISA, netiesioginis ELISA, sumuštinis ELISA ir slopinamasis ELISA. Tiesioginis, netiesioginis ir standartinis ELISA yra nekonkurencinio ELISA tipai, tuo tarpu slopinimo ELISA yra papildomos ELISA rūšis. Pagrindinis šio straipsnio tikslas yra aptarti skirtumą tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA.

TURINYS

1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra konkurencinė ELISA
3. Kas yra nekonkurencinga ELISA
4. Konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA panašumai
5. Šalutinis palyginimas - Konkurencinis ir nekonkurencinis ELISA lentelės pavidalas
6. Santrauka

Kas yra konkurencinė ELISA?

Konkurencinis ELISA matuoja antigeno koncentraciją mėginyje aptikdamas signalo trikdžius. Tyrime naudojamas inhibitoriaus antigenas. Taigi tai yra slopinimo ELISA rūšis. Šios procedūros metu mėginyje esantys antigenai konkuruoja su pasirinktu pamatiniu antigenu dėl prisijungimo prie konkretaus žymėto antikūno kiekio. Be to, ši procedūra pradedama mėginio inkubavimu, esant žymiam antikūno pertekliui. Be to, etaloninis antigenas turėtų būti iš anksto padengtas daugybinių šulinių tyrimo plokštelėje. Tada mėginio mišinys turėtų būti dedamas į tyrimo plokštelę, kurioje yra etaloninis antigenas. Laisvieji antikūnai prisijungs prie pamatinio antigeno priklausomai nuo antigeno kiekio mėginyje. Taigi, jei yra daugiau mėginio antigeno, bus aptikta mažiau pamatinio antigeno. Taigi, jis sukuria silpnesnį signalą.

01 paveikslas: ELISA

Jei mėginyje yra mažiau antigeno, vis daugiau etaloninio antigeno užima antikūnus ir duos stiprų signalą. Kadangi konkurencinis ELISA testas duoda stipresnį signalą, kai mėginyje yra mažas antigenų kiekis, konkurencinis ELISA yra labai jautrus tyrimas, net ir mėginių, kuriuose yra nedaug antigenų, atveju.

Kai kuriuose konkuruojančiuose ELISA rinkiniuose vietoj paženklinto antikūno naudojamas žymėtas antigenas. Čia pažymėtas antigenas ir mėginio antigenas konkuruos dėl prisijungimo prie pirminio antikūno. Panašiai, kai mėginyje nedaug antigeno, žymėto antigeno, kuris jungiasi su antikūnais, kiekis bus didesnis ir sukurs stipresnį signalą.

Kas yra nekonkurencinga ELISA?

Tarp keturių ELISA tipų trys yra nekonkurencingi ELISA. Tai yra tiesioginė ELISA, netiesioginė ELISA ir sumuštinė ELISA. Visi trys formatai veikia pagal bendrą ELISA principą, šiek tiek skiriasi jų metodika.

Tiesioginis ELISA tyrimas naudoja fermentą, pažymėtą pirminiu antikūnu. Taigi tam nereikia antrinio antikūno. Todėl tiesioginis ELISA yra greitesnis nei kitų rūšių ELISA. Pirminis antikūnas tiesiogiai jungiasi su imobilizuotu antigenu, esančiu plokštelėje. Taigi fermento ir substrato reakcija įvyks ir sukels matomą signalą.

02 paveikslas: Sumuštinių ELISA

Skirtingai nuo tiesioginio ELISA, netiesioginiame ELISA tyrime naudojamas nepaženklintas pirminis antikūnas ir fermentu pažymėtas antrinis antikūnas. Kai pirminis antikūnas jungiasi su imobilizuotu antigenu, antrinis antikūnas jungiasi su pirminiu antikūnu. Antriniame antikūnyje esantis fermentas reaguos su antigenu ir sukels matomą signalą. Sumuštinis ELISA skiriasi tiek tiesioginiu, tiek netiesioginiu ELISA. Antikūnas imobilizuojamas prie tyrimo plokštelės sienos.

Kokie yra konkurencinio ir nekonkurencingo ELISA panašumai?

• Konkurencinis ir nekonkurencinis ELISA yra dviejų rūšių imunosorbcinio tyrimo metodai.
• Tai labai lanksti ir jautri technika.
• Be to, ir konkuruojanti, ir nekonkurencinė ELISA yra su fermentais susiję imunologiniai tyrimai.
• Be to, abu metodai sukuria signalą dėl fermento-substrato reakcijos.

Kuo skiriasi konkurencinė ir nekonkurencinė ELISA?

Konkurencinis ELISA yra tas ELISA tipas, kuris priklauso nuo analitės antigeno ir pažymėto antigeno užbaigimo ribotam specifinio antikūno kiekiui. Kita vertus, nekonkuruojančiame ELISA tyrime nėra tokio konkurencijos tarp dominančio antigeno ir pamatinio antigeno. Taigi tai yra pagrindinis skirtumas tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA. Panašiai konkurencinis ELISA yra slopinamasis ELISA, o nekonkurencinis ELISA nėra slopinamasis ELISA. Taigi, tai yra ir skirtumas tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA.

Be to, konkurencinis ELISA yra tinkamesnis norint išmatuoti mažą dominančio antigeno kiekį. Tai yra jautrus metodas. Kita vertus, nekonkurencinis ELISA testas nepriklauso nuo mėginyje esančių antigenų skaičiaus. Todėl tai taip pat yra skirtumas tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA.

Žemiau infografikoje paaiškinamas palyginti skirtumas tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA.

Santrauka - Konkurencinis ir nekonkurencinis ELISA

Konkurencinis ir nekonkurencinis ELISA yra du pagrindiniai ELISA arba fermentų sujungtų imunosorbentinių tyrimų tipai. Apibendrinant skirtumą tarp konkuruojančio ir nekonkurencingo ELISA, konkurencinis ELISA priklauso nuo konkurencijos tarp dominančio antigeno ir pamatinio antigeno dėl riboto antikūnų kiekio. Todėl konkuruojanti ELISA taip pat vadinama slopinančia ELISA. Kita vertus, nekonkurencingas ELISA metodas nepriklauso nuo tikslinių antigenų ir pamatinių antigenų konkurencijos. Jis naudoja žymėto specifinio antikūno perteklių norimos analitės link. Taigi tai yra pagrindinis skirtumas tarp konkurencingos ir nekonkurencingos ELISA. Tiesioginis ELISA, netiesioginis ELISA ir sumuštinis ELISA yra trys pagrindiniai nekonkurencingo ELISA tipai.

Nuoroda:

1. Bio-Rad. „ELISA tipai | „Bio-Rad“. Biografija, galima rasti čia.
2. „Keturi ELISA tipai“. „Cusabio Life Science“ - jūsų biologijos mokslo partneris, prieinamas čia.

Vaizdo mandagumas:

„Elisa tipus“ Autorius: Carolfv333 - Nuosavas darbas (CC BY-SA 4.0).
„Sumuštinių imuninis tyrimas, ELISA“, pateikė NickCT - Savo darbas (CC BY-SA 3.0) per „Commons Wikimedia“