Skirtumas tarp tiesioginio ir netiesioginio ELISA

Pagrindinis skirtumas - tiesioginis ir netiesioginis ELISA
 

Su fermentais susijęs imunologinis tyrimas (ELISA), dar žinomas kaip fermento imunologinis tyrimas, yra serologinis tyrimas, kurio metu nustatomi antikūnai kraujyje. Jis naudojamas kaip diagnostikos priemonė norint išsiaiškinti, ar pacientas nebuvo paveiktas tam tikro tipo viruso ar kito infekcijos sukėlėjo (antigeno) ir ar organizmas pagamino antikūnus prieš infekciją. ELISA taip pat gali nustatyti buvusias ir dabartines infekcijas. Taigi gydytojai ELISA metodą dažnai naudoja kaip išankstinį patikrinimą, prieš pradėdami nuodugnią ligų analizę. Šį tyrimą galima atlikti laboratorijoje, paimant iš paciento kraujo mėginį. Yra du ELISA testų tipai: tiesioginis ELISA ir netiesioginis ELISA tyrimas. Pagrindinis skirtumas tarp tiesioginio ir netiesioginio ELISA yra tas netiesioginis ELISA yra jautresnis ir reikalauja papildomo antrinio antikūno kol tiesioginė ELISA yra mažiau jautrus ir naudoja tik pirminį antikūną.

TURINYS
1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra tiesioginė ELISA
3. Kas yra netiesioginė ELISA
4. Lyginimas iš šono - tiesioginis ir netiesioginis ELISA
5. Santrauka

Kas yra tiesioginė ELISA?

ELISA yra ligos diagnostinis tyrimas, atliekamas tam tikrų antigenų ar antikūnų buvimui kraujyje nustatyti. Tai atliekama kaip plokštelių tyrimas. Tam naudojami antikūnai, susieti su lengvai tiriamais fermentais. Antigenai serumo mėginyje jungiasi su specifiniais antikūnais, sujungtais su fermentais. Paskutiniame etape pridedamas specifinis substratas, kad jis reaguotų su fermentu. Fermentas paverčia substratą spalvotu arba signalą sukuriančiu produktu. Spalvos pasikeitimas cheminiame substrate parodo tam tikro antikūno buvimą serumo mėginyje. Tiesioginiame ELISA tyrime naudojamas tik pirminis antikūnas, susietas su fermentu. Prisijungęs prie antigeno, jis greitai keičia spalvą, nurodydamas infekcijos sukėlėjo buvimą kraujyje. Tačiau tiesioginio ELISA būdu signalų intensyvumas yra silpnesnis, nes epitopai ribojasi tik su antigenų jungimu. Taigi tiesioginis ELISA yra mažiau jautrus, palyginti su netiesioginiu ELISA.

01 paveikslas: Tiesioginis ELISA testas

Kas yra netiesioginė ELISA?

ELISA gali būti atliekama naudojant dviejų tipų antikūnus, būtent; pirminis antikūnas ir antrinis antikūnas. Netiesioginis ELISA įrankis naudoja abiejų tipų antikūnus, kad sustiprintų signalus, kad būtų geriau aptinkamas. Netiesioginė ELISA metodika atliekama taip.

1. Plokštės inkubuojamos su antigenais ir plaunamos, kad blokuotų nespecifinį surišimą.
2. Tada pridedami ir plaunami pirminiai antikūnai.
3. Pridedami su fermentais susieti antriniai antikūnai ir plaunami.
4. Pridedamas substratas ir jam leidžiama reaguoti su fermentais.
5. Signalai aptinkami ir nustatomas specifinio antigeno buvimas mėginyje arba jo nebuvimas.

Netiesioginiame ELISA tyrime keli antriniai antikūnai gali jungtis prie vieno pirminio antikūno. Antriniai antikūnai yra susieti su lengvai tiriamais fermentais. Todėl vienas įrišimas gali duoti stiprų signalą dėl daugiau nei vienos sąveikos. Taigi netiesioginė ELISA yra jautresnė nei tiesioginė ELISA. Tačiau netiesioginis ELISA tyrimas gali duoti nespecifinius signalus dėl kryžminių antrinių antikūnų reakcijų.

02 paveikslas: Netiesioginis ELISA testas

Kuo skiriasi tiesioginė ir netiesioginė ELISA?

Tiesioginis ir netiesioginis ELISA
Tiesioginis ELISA yra mažiau jautrus, palyginti su netiesioginiu ELISA.	Netiesioginis ELISA yra jautresnis.
Paimtas laikas
Tiesioginis ELISA testas yra greitas procesas.	Netiesioginis ELISA tyrimas užima daug laiko.
Antikūnų naudojimas
Tiesioginiame ELISA tyrime naudojami tik vieno tipo antikūnai (pirminiai antikūnai).	Pirminiai ir antriniai antikūnai naudojami netiesioginiam ELISA tyrimui.
Ryšys su fermentais
Pirminiai antikūnai yra susieti su fermentais.	Antriniai antikūnai yra susieti su fermentais.
Antrųjų antikūnų kryžminis reaktyvumas
Tiesioginis ELISA tyrimas pašalina kryžminį antrųjų antikūnų reaktyvumą.	Netiesioginis ELISA yra paveiktas antrųjų antikūnų kryžminio reagavimo.
Signalai
Signalai yra silpni, palyginti su netiesioginiu ELISA.	Signalai stiprinami netiesiogine ELISA. Taigi ją nesunku aptikti.

Santrauka - Tiesioginis ir netiesioginis ELISA

ELISA yra biocheminis metodas, daugiausia naudojamas imunologijoje, siekiant nustatyti antikūnus ar antigenus paciento kraujo mėginyje. Tai galima atlikti dviem procesais, vadinamais tiesioginiu ar netiesioginiu ELISA. Tiesioginiame ELISA tyrime antigenui nustatyti naudojami tik pirminiai antikūnai, o netiesioginiame ELISA - tiek pirminiai, tiek antriniai antikūnai. Atliekant tiesioginį ELISA testą, pirminiai antikūnai žymimi, tuo tarpu netiesioginiame ELISA tyrime - antriniai antikūnai. Tai yra skirtumas tarp tiesioginio ir netiesioginio ELISA.

Nuorodos
1. „Su fermentais susijęs imunosorbentų tyrimas (ELISA).“ Pasaulio sveikatos organizacijos biuletenis. JAV nacionalinė medicinos biblioteka, 1976 m. Žiniatinklis. 2017 m. Kovo 29 d
2. Loonas, A. M vanas, J. T Van Der Logtas, F. W. Heessenas ir J. Van Der Veenas. „Su fermentais susijęs imunosorbentų tyrimas, kurio metu naudojamas pažymėtas antigenas nustatant imunoglobulino M ir A antikūnus toksoplazmozėje: palyginimas su netiesioginiu imunofluorescencijos ir dvigubo sumuštinio fermento imunosorbentų tyrimu.“ Klinikinės mikrobiologijos žurnalas. JAV nacionalinė medicinos biblioteka, 1983 m. Birželio mėn. Žiniatinklis. 2017 m. Kovo 29 d

Vaizdo mandagumas:
1. Cavitri „ELISA schema“ - Savas darbas (CC BY 3.0) per „Commons Wikimedia“ 
2. „Netiesioginė ELISA“ - autorius Cawang - Savas darbas (CC0) per „Commons Wikimedia“