Skirtumas tarp plono popieriaus ir kolonėlės chromatografijos

Pagrindinis skirtumas - popierius ir plonas sluoksnis vs Stulpelis Chromatografija
 

Popieriaus chromatografija, plonasluoksnė chromatografija ir kolonėlės chromatografija yra trijų tipų chromatografijos metodai. pagrindinis skirtumas tarp popieriaus chromatografijos, plono sluoksnio chromatografijos ir kolonėlės chromatografijos yra pagrįstos nejudančios fazės rūšimi, naudojama chromatografijos metodu. Popieriaus chromatografijoje stacionarioje fazėje naudojamas celiuliozinis popierius, plonojo sluoksnio chromatografijoje stacionarioji fazė naudojama aliuminio oksido arba silikagelio pavidalu, tuo tarpu kolonėlės chromatografijos metu stacionari fazė naudojama su tinkama matricine medžiaga užpildyta kolonėle..

Atskiriant ir identifikuojant tokias biologines molekules kaip baltymai ir angliavandeniai, chromatografija yra svarbi naudojama biofizinė technika. Chromatografija atskiria junginius pagal jų tirpumą, dydį ir krūvį. Remiantis atskyrimo mechanizmu, chromatografijoje naudojami tokie mechanizmai kaip jonų mainai, absorbcija, pasiskirstymas ir dydžio pašalinimas. Yra trys chromatografijos metodai; būtent popieriaus, plono sluoksnio ir kolonėlės chromatografija. Popieriaus chromatografija pagrįsta kietojo skysčio adsorbcija ir junginio tirpumu, o stacionarioje fazėje naudojamas celiuliozės popierius. Plono sluoksnio chromatografija pagrįsta kietų ir skystų molekulių adsorbcija. Jis turi nejudančią fazę, paprastai pagamintą iš aliuminio oksido arba silikagelio, ir judančiąją fazę, kuri yra tirpiklis. Kolonėlių chromatografijoje naudojama kolonėlė, užpildyta matrica, kuri naudojama molekulėms atskirti, atsižvelgiant į jų dydį, afinitetą ar krūvį..

TURINYS

1. Chromatografijos apžvalga ir pagrindiniai skirtumai
2. Kas yra popieriaus Chromatografija
3. Kas yra plonasluoksnė chromatografija
4. Kas yra kolonų chromatografija
5. Popieriaus, plono sluoksnio ir kolonėlės chromatografijos panašumai
6. Lyginimas iš šono - lentelės formos popieriaus ir plono sluoksnio vs stulpelio chromatografija
7. Santrauka

Kas yra popieriaus Chromatografija?

Popierinė chromatografija yra paprasčiausia naudojama chromatografijos rūšis, ji nėra naudojama išsamiems tyrimams. Dažniausiai jis naudojamas studentų laboratorijose, siekiant nustatyti biologines molekules, tokias kaip aminorūgštys ir angliavandeniai, esantys mišiniuose. Popieriaus chromatografijoje naudojama nejudanti fazė, pagaminta naudojant celiuliozės popierių arba Whatmano filtravimo popierių, ir mobilioji fazė, paprastai ruošiama naudojant organinius tirpiklius, tokius kaip n-butanolis ir kt. Stacionarioji fazė yra prisotinta vandens, todėl nejudama fazė tampa skysta. Taigi, kai junginiai pastebimi ir jiems leidžiama tekėti esant judančiajai fazei, atsižvelgiant į junginių tirpumą, jie yra atskirti. Taigi, parengus chromatogramą, galima nudažyti, kad būtų galima nustatyti kiekvieno junginio bandymo ilgį. Tokiu būdu galima apskaičiuoti sulaikymo koeficientą.

01 paveikslas: Popieriaus chromatografija

Popieriaus chromatografija gali būti toliau klasifikuojama kaip kylančiosios ir mažėjančiosios chromatografijos, atsižvelgiant į tekančio tirpiklio kryptį..

Kas yra plonasluoksnė chromatografija?

Plonojo sluoksnio chromatografija arba TLC yra dažniausiai naudojamas metodas skirtingoms mišiniuose esančioms aminorūgštims arba baltymams identifikuoti. Atskyrimo technika pagrįsta kietojo skysčio adsorbcija. Atliekant plonasluoksnę chromatografiją, kaip nejudančioji fazė naudojama plokštė, pagaminta iš aliuminio oksido arba silikagelio. Tirpiklio mišinys kinta priklausomai nuo poreikio, ir tirpikliui gaminti gali būti naudojami skirtingi organinių junginių, tokių kaip n-butanolis, acto rūgštis ir vanduo, deriniai. Atskiriami junginiai pastebimi ant plokštelės ir panardinami į tirpiklio mišinį. Kai tirpiklis eina į viršų, remdamasis kapiliarų poveikiu, kurį suteikia plokštelė, ant plokštelės pastebėti junginiai taip pat juda priklausomai nuo jų tirpumo tirpiklyje.

02 paveikslas: Plono sluoksnio chromatografija

Dėmės aptinkamos po chromatogramos, naudojant skirtingas dažymo procedūras. Kai kurie naudoja ninhidrino dažymą, kuris yra gana toksiškas dažymo būdas. Šiuolaikinėse plonojo sluoksnio chromatogramose naudojami fluorescenciniai metodai, kad būtų galima pamatyti chromatogramą po bandymo. Atsižvelgiant į nuvažiuotus atstumus, galima apskaičiuoti kiekvieno junginio sulaikymo laiką. Tai gali būti naudojama nustatant junginio, atskirto pagal naudojamą mišinį, tipą. TLC daugiausia naudojamas aminorūgštims baltymų mišinyje identifikuoti, taip pat atskiriant įvairių rūšių mišinyje esančius monosacharidus..

Kas yra kolonų chromatografija?

Kolonėlės chromatografija yra platus terminas, naudojamas apibūdinti daugelio rūšių chromatografijos metodus, kuriuose naudojamas kolonų atskyrimo metodas. Kolonėlių chromatografijoje junginiams atskirti naudojama fizinė kolonėlė su pakavimo medžiaga. Atskyrimas gali būti pagrįstas skirtingomis junginių fizikinėmis savybėmis. Šios savybės gali būti krūvis, dydis, 3D formacija ir rišamosios galios ir tt Taigi, kolona, ​​užpildyta matricos medžiaga, veikia kaip nejudanti fazė, o kolonai taikomas plovimo buferis veikia kaip judančioji fazė..

Jei molekulės yra atskirtos atsižvelgiant į dydį, pakavimo medžiaga supakuojama taip, kad junginiai galėtų išeiti iš porų. Taigi pirmiausia išplaunamos didesnės molekulės, kurios negali tekėti per poras, tuo tarpu mažesnėms molekulėms eliuavimas užtrunka daug ilgiau..

03 paveikslas: Stulpelio chromatografija

Jei molekulės yra atskirtos atsižvelgiant į jų krūvį, nejudančioje fazėje bus arba anijonas, arba katijonitas, į kurį junginiai bus patrauklūs pagal jų krūvį. Taigi skalbimo metu nepririšti junginiai išplauks. Pridėjus eliuavimo buferį, surišti įkrauti junginiai eliukuosis. Šie eluentai aptinkami daugiausia spektrofotometriniais metodais.

Kokie yra plono popieriaus sluoksnio ir kolonų chromatografijos panašumai?

• Biomolekulėms, tokioms kaip aminorūgštys, baltymai ir angliavandeniai, atskirti naudojami visi popieriaus plono sluoksnio ir kolonų chromatografijos metodai..
• Popieriaus plono sluoksnio ir kolonėlės chromatografijos būdai turi judančią ir nejudančią fazes.
• Popieriaus plono sluoksnio ir kolonų chromatografijos metodais atskyrimui naudojami biofiziniai mechanizmai.

Kuo skiriasi plonas popieriaus sluoksnis ir kolonų chromatografija?

Popieriaus ir plono sluoksnio vs stulpelio chromatografija
Popieriaus chromatografija	Popierinė chromatografija yra chromatografijos metodas, naudojamas junginiams atskirti pagal skysčio-skysčio adsorbciją ir junginio tirpumą. Kaip nejudančią fazę jis naudoja celiuliozės popierių.
Plonasluoksnė chromatografija	Plono sluoksnio chromatografija yra dar viena chromatografijos technika, pagrįsta kietų ir skystų molekulių adsorbcija. Jis turi nejudančią fazę, pagamintą iš aliuminio oksido arba silikagelio, ir tirpiklį kaip judančiąją fazę, kuri yra tirpiklis.
Kolonos chromatografija	Kolonėlių chromatografijoje naudojama kolonėlė, užpildyta matrica, kuri naudojama molekulėms atskirti, atsižvelgiant į jų dydį, afinitetą ar krūvį..
Stacionari fazė
Popieriaus chromatografija	Popierius, pagamintas iš Whatmano nitroceliuliozės, naudojamas kaip nejudanti fazė popieriaus chromatografijoje.
Plonasluoksnė chromatografija	Plonasluoksnės chromatografijos stacionarioji fazė naudojama aliuminio oksido arba silikagelio pavidalu.
Kolonos chromatografija	Kolonėlė, užpildyta tinkama pakavimo medžiaga, naudojama kaip nejudanti fazė kolonėlės chromatografijoje.
Mobilioji fazė
Popieriaus chromatografija	Bėgimo tirpiklis yra judančioji popieriaus chromatografijos fazė.
Plonasluoksnė chromatografija	Bėgimo tirpiklis yra judančioji plonojo sluoksnio chromatografijos fazė.
Kolonos chromatografija	Plovimo buferis yra judanti kolonėlės chromatografijos fazė.
Atskyrimui naudojami mechanizmai
Popieriaus chromatografija	Popieriaus chromatografija pagrįsta kieto skysčio absorbcija.
Plonasluoksnė chromatografija	Plono sluoksnio chromatografija pagrįsta kietų skysčių absorbcija.
Kolonos chromatografija	Kolonėlės chromatografija pagrįsta dydžio pašalinimu, krūviu ir forma.
Eliuavimo buferis
Popieriaus chromatografija	Nereikalaujama popieriaus chromatografijos.
Plonasluoksnė chromatografija	Nebūtina plonasluoksnei chromatografijai.
Kolonos chromatografija	Reikalaujama kolonėlės chromatografijoje.
Aptikimas
Popieriaus chromatografija	Dažymas ir nustatant sulaikymo koeficientą.
Plonasluoksnė chromatografija	Dažymas ir nustatant sulaikymo koeficientą.
Kolonos chromatografija	Spektrofotometrinis nustatymas.

Santrauka - Popieriaus plonasluoksnis vs Stulpelis Chromatografija

Popieriaus chromatografija, plonasluoksnio skysčio chromatografija ir kolonėlės chromatografija yra atskyrimo būdai, naudojami atskirti tokias biologines molekules kaip baltymai, aminorūgštys ir angliavandeniai (daugiausia monosacharidai). Popieriaus chromatografijoje stacionarioje fazėje naudojamas celiuliozinis popierius, o atskyrimo mechanizmas pagrįstas kietojo skysčio adsorbcija. TLC taip pat naudojami kietojo skysčio adsorbcijos mechanizmai. Molekulės yra atskirtos nejudančioje fazėje, atsižvelgiant į jų tirpumą judančioje fazėje. Kolonėlės chromatografijoje naudojamos fizinės savybės, tokios kaip dydis, forma, krūvis ir junginio molekulinė masė. Kolona, ​​užpildyta matricos medžiaga, veikia kaip nejudanti fazė, o plovimo buferis veikia kaip tirpiklio fazė. Tai yra skirtumas tarp popieriaus plono sluoksnio ir kolonėlės chromatografijos.

Nuoroda:

1.Clarkas, Džimas. „PLAČIOJO sluoksnio CHROMATOGRAFIJA“. Plono sluoksnio Chromatografija, 2007. Galima rasti čia 
2.Coskun, Ozlem. „Atskyrimo būdai: Chromatografija“. Stambulo šiaurinės klinikos, „Kare Publishing“, 2016. Galima rasti čia 

Vaizdo mandagumas:

1. „Chromatografijos bakas“ (CC BY-SA 3.0) per „Commons Wikimedia“  
2. „TV seka“ - „Quantockgoblin“ (viešasis domenas) per „Commons Wikimedia“
3. „Kolonos chromatografija“ (viešas domenas) per „Commons Wikimedia“