pagrindinis skirtumas tarp atvirkštinės fazės ir normaliosios fazės HPLC yra tai, kad atvirkštinės fazės HPLC naudoja polinę nejudančią fazę ir mažiau poliarinę judančią fazę, tuo tarpu normalios fazės HPLC naudoja nepolinę nejudančią fazę ir polinę judančią fazę.
Normalios fazės HPLC yra seniausia HPLC technika, kurią Tswett naudojo atskyrdamas augalų ekstraktus; stiklinėje kolonoje jis naudojo kreidą. Tai buvo klasikinis chromatografijos būdas, kuris paskatino jį pavadinti „normalia“ technika. Atvirkštinės fazės HPLC, atvirkščiai, yra priešinga įprastam metodui, kurį pastaruoju metu sukūrė mokslininkai.
1. Apžvalga ir svarbiausias skirtumas
2. Kas yra atvirkštinės fazės HPLC
3. Kas yra normaliosios fazės HPLC
4. Šalutinis palyginimas - atvirkštinės fazės ir normalios fazės HPLC lentelės pavidalu
5. Santrauka
Atvirkštinės fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kuriame mes naudojame hidrofobinę nejudančią fazę. Tarp visų HPLC metodų mes naudojame šį metodą maždaug 70% dėl jo plataus pritaikomumo ir atkuriamumo. Nejudanti fazė yra nepolinė, o judančioji fazė yra polinė.
Dažniausiai mokslininkai mobiliąja faze naudoja vandeninį vandens mišinį su lengvai maišomu poliniu organiniu tirpikliu, tokiu kaip acetonitrilas ar metanolis. Todėl analitės sąveikauja su nepoliarine nejudančia faze.
Normalios fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kai mes naudojame nekintamą hidrofilinę fazę. Tai yra tradicinis HPLC metodas, nors mes jo nenaudojame tiek. Nejudanti fazė yra polinė, o judančioji - nepolinė. Dar svarbiau, kad mobilioji šios technikos fazė yra 100% ekologiška. Tai reiškia, kad tam nenaudojamas vanduo.
01 paveikslas: Normaliosios fazės ir atvirkštinės fazės HPLC chromatogramų mėginio profilis atsižvelgiant į analitės komponentų poliškumą.
Paprastai nejudančioje fazėje yra silicio dioksido, ciano, diolio, aminorūgščių fazės ir tt. Judriosios fazės apima organinius tirpiklius, tokius kaip heksanas, etilo acetatas ir kt. Ši metodika grindžiama tirpiklio ar analitės molekulių sulaikymu polinėje nejudančioje fazėje..
Atvirkštinės fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kuriame mes naudojame hidrofobinę nejudančią fazę. Stacionarus šios technikos etapas yra nepolinis. Nejudanti fazė yra nepolinė, o judančioji fazė yra polinė. Be to, mokslininkai kaip judriąją fazę atvirkštinės fazės HPLC naudoja vandeninį vandens mišinį su maišomu poliniu organiniu tirpikliu, pavyzdžiui, acetonitrilu ar metanoliu. Tuo tarpu normaliosios fazės HPLC yra chromatografijos metodas, kai mes naudojame nekintamą hidrofilinę fazę. Nejudanti šios technikos fazė yra polinė. Nejudanti fazė yra polinė, o mobilioji fazė yra nepolinė. Be to, mokslininkai kaip normaliosios fazės HPLC judriąją fazę naudoja organinius tirpiklius, tokius kaip heksanas, etilo acetatas ir kt. Žemiau pateiktoje infografijoje lentelės forma pateiktas skirtumas tarp atvirkštinės fazės ir normaliosios fazės HPLC.
Atvirkštinės fazės ir normaliosios fazės HPLC metodai yra du skysčių chromatografijos metodai. Skirtumas tarp atvirkštinės ir normalios fazės HPLC yra tas, kad atvirkštinės fazės HPLC naudoja polinę nejudančią fazę ir mažiau poliarinę judančią fazę, tuo tarpu normalios fazės HPLC naudoja nepolinę nejudančią fazę ir polinę judančią fazę..
1. Vandenys. „HPLC atskyrimo režimai“. HPLC - paaiškinta aukšto efektyvumo skysčių chromatografija: vandenys. Galima rasti čia